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人博卡病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書

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更新日期:
2020-11-19
點(diǎn)擊次數(shù):
1210
產(chǎn)品特點(diǎn):
人博卡病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
  50T人博卡病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書的詳細(xì)資料:

實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

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產(chǎn)品名稱

人博卡病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書

 規(guī)格

 50T

 貨號(hào)

 HE32001-R

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
     5.   優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
甲醇中2,6-二硝基甲溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒C型PCR試劑盒

甲醇中1,4-二硝基溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒C型染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中1,3-二硝基溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒C型探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中1,2-二硝基溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒D型PCR試劑盒

甲醇中1,2-二氯-d4溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒D型染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯甲烷(1:1)中芴溶液 2ml Adenovirus(AV)腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯甲烷(1:1)中苊溶液 2ml Adenovirus(AV)腺病毒E型PCR試劑盒

甲醇/二氯甲烷(1:1)中芘溶液 2ml Adenovirus(AV)腺病毒E型染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯甲烷(1:1)中?溶液 2ml Adenovirus(AV)腺病毒E型探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中萘溶液 1.2mL Adenovirus(AV)腺病毒F型PCR試劑盒

甲醇/二氯甲烷(1:1)中萘溶液 2ml Adenovirus(AV)腺病毒F型染料法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中菲-D10溶液 2ml Adenovirus(AV)腺病毒F型探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯甲烷(1:1)中菲溶液 2ml Adenovirus(AV)腺病毒通用PCR試劑盒

甲醇/二氯甲烷(1:1)中二氫苊溶液 2ml Adenovirus(AV)腺病毒通用染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯甲烷(1:1)中并[K]熒蒽溶液 2ml Adenovirus(AV)腺病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒

PUC18/PUC18質(zhì)粒BR20微克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃

中文名稱: PUC18

其他名稱: PUC18質(zhì)粒

產(chǎn)品規(guī)格: BR

包裝: 20微克

級(jí)別:BR

濃度:450ug/ml

性狀:液體或粉末。pUC18是適合于雙脫氧法DNA測(cè)序的載體,通常運(yùn)用于重組dna的分子克隆中,首先我們制備大腸桿菌的感受態(tài)細(xì)胞(能接受外來重組的dna),這種感受態(tài)菌株必須不同外來DNA分子發(fā)生遺傳重組,通常是rec基因缺陷型的突變體,同時(shí)它們必須是限制系統(tǒng)缺陷或限制與修飾系統(tǒng)均缺陷的菌株,即具有具有這三種缺陷(rk mk rec ),同時(shí)對(duì)氨芐青霉素敏感(ap)。puc18載體自身帶有抗氨芐青霉素基因,而外源片段不具有,這樣只有帶有puc18的轉(zhuǎn)化子的菌株才能在氨芐青霉素平板上存活,而外源片段自身環(huán)化的不能存活,這稱為抗性篩選。pUC18 上帶有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調(diào)控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 個(gè)氨基酸的編碼序列,在這個(gè)編碼區(qū)中插有一個(gè)多克隆位點(diǎn),且不影響正常功能,DH5α感受態(tài)菌株帶有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的編碼信息,當(dāng)puc18載體在正常情況下同感受態(tài)菌株融合后,互補(bǔ)表達(dá)具有酶活性的蛋白質(zhì),稱為α-互補(bǔ)現(xiàn)象,當(dāng)有外源片段插入多克隆位點(diǎn)后,互補(bǔ)現(xiàn)象消失,其形成的菌株顏色具有很大的差異,很容易鑒別,這種篩選方法稱為α-互補(bǔ)現(xiàn)象篩選。由上可見,puc18載體除了能重組導(dǎo)入外源片段外,在篩選表達(dá)過程中還具有重要的作用

用途:生化研究。克隆外源基因。利用lac promor進(jìn)行基因表達(dá)。使用M13 primers進(jìn)行DNA測(cè)序。

保存:-20℃
人博卡病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書甘丙肽受體3抗體Cleroindicin E別名: 分子式: C8H14O3性狀: Oil純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 長(zhǎng)管大青;老鴉煙筒花;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

腦腸肽受體抗體Sarmentosin別名: 分子式: C11H17NO7性狀: Oil純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 抗肝毒;垂盆草;基葡糖苷;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

GRC5蛋白抗體Methyl levulina別名: 分子式: C6H10O3性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

腸和大腦特定同源蛋白1抗體2-(4-Chloro-3-hydroxy-1-butynyl)-5-(1,3-pentadiynyl)thiophene別名: 分子式: C13H9ClOS性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

生長(zhǎng)分化因子6抗體2-Chloro-1-(5'-(prop-1-ynyl)-2,2'-bithiophen-5-yl)ethanol別名: 分子式: C13H11ClOS2性狀: Yellow powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

鳥嘌呤核苷交換因子GEFT抗體Shikimic acid別名: 分子式: C7H10O5性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 莽草;莽草;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

膠漿成熟因子β抗體Fumaric acid別名: 分子式: C4H4O4性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 抗牛皮癬;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

蛋白偶聯(lián)受體56抗體3-Methoxyfuran別名: 分子式: C5H6O2性狀: Powder純度: 99.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 人博卡病毒 PCR檢測(cè)試劑盒 50T
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