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擬桿菌屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-28
點擊次數(shù):
1331
產(chǎn)品特點:
擬桿菌屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次擬桿菌屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

PCR技術(shù)的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。

產(chǎn)品名稱

擬桿菌屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Bacteroides spp.

貨號

 YSP96421

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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設(shè)計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
氧化苦參(標準品)DDR2 Antibody2-羥基異煙酸

穿心蓮內(nèi)酯CDK5 (1H3) Mouse mAb6-氯-2-甲基-硝基吡啶

穿心蓮內(nèi)酯(標準品)Brn2/POU3F2 (D2C1L) Rabbit mAb2-氯-甲基-5-硝基吡啶

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芹菜素(標準品)SignalSilence® PKD2 siRNA I3,二氫-7-羥基-2(1H)-喹啉酮

齊墩果酸Phospho-NEDD4L (Ser342) (D16D6) Rabbit mAb2-羥基-三氟甲基吡啶

齊墩果酸(高純98%)PD184352二氟甲氧基

齊墩果酸(標準品)PTMScan® Lys-C Digesd Control Peptides I2-氯-硝基-6-溴

莽草酸Acetyl-α-Tubulin (Lys40) (6-11B-1) Mouse mAb甲酸甲酯

莽草酸(標準品)IL-6 (D3K2N) Rabbit mAb6-溴吲哚酮

羊藿苷MAPKAPK-2 (D1E11) Rabbit mAb7-硝基-1,2,3,四氫異喹啉鹽酸鹽

羊藿苷(標準品)EML4 (D7Y8F) XP® Rabbit mAb2-氨基-甲酸甲酯

利奧西呱,BAY 62521Human EGF Neutralizing (D8A1) Rabbit mAb萘普生

馬來酸非尼拉敏Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)(S)-基-2-唑烷酮

DANSYL-GCVLSLLGL1 (D2B5A) Rabbit mAb3,二羥基-2'-氯乙酮

利那洛肽Ki-67 (D3B5) Rabbit mAb (PE Conjuga)5-溴二氫吲哚

甲酰芍藥苷(標準品)IL-10 (D13A11) XP® Rabbit mAb乙氧羰基-乙氧基

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兔過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARG)ELISA試劑盒DCP  異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體100 ul

兔過氧化物酶體增殖物激活受體β(PPARβ)ELISA試劑盒Doublecortin  雙皮質(zhì)素抗體100 ul

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產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 擬桿菌屬通用 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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